目前国内血小板主要保存方式是22℃振荡保存,有效期为5d。此外血小板还可深低温冰冻保存,但这种方法的保存效果和临床疗效不确切。近年冷冻干燥技术已广泛应用于各种生物材料的保存,冻干制品具有常温下保存、性能稳定、便于运输的特点。本研究以过期血小板为原料,探索血小板冻干再水化的条件,检测其冻干再水化后凝血功能的变化,为过期血小板再利用及新鲜血小板冰冻或低温保存研究提供了依据。
骏德仪器实验型FD-503血液冷冻干燥机在市场上应用而生,成功助力各大科研单位,满足了各个客户的实验需求。
冻干工艺介绍:
1.1.1血小板来源实验组选择体检合格,一周内未服用**林等抗血小板药物的自愿献血者,用血细胞分离机单采富含血小板血浆,22℃振荡保存5d过期;对照组选择新鲜机采血小板。
1.1.2主要试剂和溶液海藻糖(CH22O11·2H2O,北京经科宏达生物技术有限公司);牛血清白蛋白(BSA,上海生工生物工程有限公司);磷酸盐缓冲液(PBS);血小板聚集诱导剂二磷酸腺苷(ADP,Sigma公司);**酶(Sigma公司);胶原(Sigma公司);瑞斯托霉素(Sigma公司);CD62P-PE(Bioscience公司);PAC-1-FITC(BDIS公司);海藻糖加载缓冲液(含50mmol/L海藻糖,100mmol/LNaCl,10mmol/LKCl,10mmol/LEGTA,pH为6.8);冻干保护剂(含20%海藻糖,1%牛血清白蛋白,9.5mmol/LHEPES,142.5mmol/LNaCl,4.8mmol/LKCl,1mmol/LMg-Cl2);复水溶液为PBS缓冲液和蒸馏水以3:1比例混合制成。以上试剂和溶液均在有效期内。
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