与三羟甲基an基甲烷有关的名称有很多,比如Tris、Tris碱、Tris-HCl、Tris-cl、Bis-Tris等等,这些试剂名称很相似容易混淆,而且网络上的信息有很多错误和混乱,另很多的科研工作者一直困扰,本文将介绍这些试剂之间的区别。
Tris与Tris碱:
这两者就是同一个东西,通常成为三羟甲基an基甲烷或三羟甲基甲胺(THAM),也称为氨(基)丁三醇,规范的系统命名为2-氨基2-羟甲-1,3-基丙二醇,在医药领域叫做缓血酸胺。Tris是一种氨基多元醇,水溶液显碱性,是一种不含金属阳离子的有机弱碱,故称作Tris碱。Tris base实际也是指的Tris,一般是指Tris的溶液或Tris buffer缓冲液。
Tris-HCl与Tris-cl
这两者也是同一种试剂,只是写法上有所不同,Tris-HCl就是在Tris-base的溶液中加入适当量的盐酸,调成你所需要的PH值罢了。Tris系列的缓冲液可以灭菌,虽然这一点网上有争议,详细的可以去了解《分子克隆》。Tris系列的缓冲液(或HEPES)是能够用DEPC处理飞,不过这类含胺试剂会加速DEPC的水解。但如果你一定要用DEPC处理的话,把DEPC的终浓度增大至1%,所达到的效果就会和0.1%的效果一样的。
常用Tris-HCl缓冲液配制:Tris-HCl(0.05mol/L,25℃) 50ml 0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与x ml 0.1mol/L 盐酸混匀后,加水稀释至100ml。
通常采购的Tris试剂会有一定差异,要想配准Tris缓冲体系的PH值,还是在PH计监测的同时加入盐酸的为好(严禁使用微量加样器吸取盐酸!!!)。
特别注意的是Tris有些地方指的是三硬脂酸甘油酯,但它不是氨丁三醇,有些地方混淆严重。德晟是专门的Tris试剂生产厂家,可提供Tris以及其它各种缓冲剂。